近年來，隨著生豬良種補(bǔ)貼項(xiàng)目的逐年實(shí)施，市場(chǎng)上豬精液稀釋粉的種類繁多，究竟哪些稀釋粉的稀釋保存效果好，推廣使用中眾說紛紜。為探索稀釋保存效果好的稀釋粉來進(jìn)行推廣，我們結(jié)合曲靖稀釋粉的使用實(shí)際，選擇7種稀釋粉于2014年6月24日至7月7日在沾益縣種公豬供精站進(jìn)行了相同條件下的稀釋保存試驗(yàn)。
1試驗(yàn)材料
1.1稀釋粉
丹麥的“ACTIYE”、西班牙的“DILTEC”及“LIFESTAR”、法國(guó)的“PRIMXCELL”、比利時(shí)的“CXM”、荷蘭的“Sperm Protecter”和曲靖自配的“靖稀 3 號(hào)”7種稀釋粉。
1.2公豬精液
現(xiàn)采集沾益縣種公豬供精站的239603號(hào)、234801號(hào)和204601號(hào)3頭大約克種公豬的原精液。
1.3儀器
恒溫水浴鍋2臺(tái)、17 ℃恒溫冰箱 1 臺(tái)、DF—PSⅢ型豬精子質(zhì)量電腦檢測(cè)系統(tǒng)1套、磁力攪拌器 1臺(tái)、電子稱量器1臺(tái)、車載 17 ℃恒溫運(yùn)輸箱 1 個(gè)。
1.4用品用具
無菌雙蒸餾水10 L，1 000 mL刻度燒杯8個(gè)，200 mL刻度燒杯8個(gè)，移液器2支，電熱恒溫板1塊，濾紙1盒，記號(hào)筆1支，量筒2個(gè)、玻棒、試管、水溫計(jì)、一次性移液頭、精密 pH 試紙若干，記錄表格1 套。
2試驗(yàn)方法
（1）將曲靖的“靖稀 3 號(hào)”、西班牙的“DILTEC”、丹麥的“ACTIYE”、法國(guó)的“PRIMXCELL”、比利時(shí)的“CXM”、荷蘭的“Sperm Protecter”、西班牙的“LIFESTAR”7種稀釋粉按使用說明分別用同質(zhì)無菌雙蒸餾水在磁力攪拌器上配制成稀釋液，分別用濾紙過濾裝入7個(gè)1 000 mL刻度燒杯中，用記號(hào)筆依次分別標(biāo)上1、2、3、4、5、6、7號(hào)稀釋液，置于37 ℃恒溫水浴鍋中水浴恒溫備用。
（2）將現(xiàn)采集過濾好的第1頭大約克種公豬的原精液充分輕搖混勻，用pH試紙測(cè)定記錄pH，取樣涂片，用DF—PSⅢ型豬精子質(zhì)量電腦檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)記錄原精液的精子活力和密度等（檢測(cè)3個(gè)視野，記錄系統(tǒng)自動(dòng)形成的平均值）。取樣檢測(cè)后，將原精液再次輕搖混勻，按30 mL 17份，分別放入7個(gè)200 mL刻度燒杯中，分別標(biāo)上1、2、3、4、5、6、7號(hào)原精，置于37 ℃恒溫水浴鍋中水浴恒溫備用。
（3）在稀釋液與原精液同溫的條件下，統(tǒng)一按原精液∶稀釋液為1∶2的比例，分別用量筒準(zhǔn)確量取1、2、3、4、5、6、7號(hào)稀釋液，分別對(duì)應(yīng)1、2、3、4、5、6、7號(hào)原精液，沿原精液燒杯壁緩慢添加到原精液中，輕搖使之混勻，即完成稀釋。
（4）稀釋好以后，用pH試紙分別測(cè)定記錄7種稀釋精液的pH，隨即分別取7種稀釋精液涂片，置DF—PSⅢ型豬精子質(zhì)量電腦檢測(cè)系統(tǒng)，檢測(cè)記錄每一種稀釋精液的精子活力和密度。之后將 7 種稀釋精液用80 mL精液瓶分別分裝，用記號(hào)筆對(duì)應(yīng)標(biāo)記“公豬耳號(hào)”和“1、2、3、4、5、6、7 號(hào)”稀釋精液，置室溫條件下待溫度都降至室溫后，轉(zhuǎn)移到17 ℃恒溫冰箱保存。
（5）每隔6個(gè)小時(shí)，將17 ℃恒溫冰箱中保存的7種稀釋精液拿出來，均顛倒輕搖使之均勻，用pH試紙分別測(cè)定記錄1次pH，然后用移液器各取2 mL分別放入標(biāo)有1、2、3、4、5、6、7的7個(gè)試管中，置37 ℃恒溫水浴鍋中升溫2 min，分別從中取樣涂片，用DF—PSⅢ型豬精子質(zhì)量電腦檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)記錄活力和密度1次（每次均檢測(cè)3個(gè)視野，記錄系統(tǒng)自動(dòng)形成的平均值），直至多數(shù)稀釋精液的精子活力降至30%以下為止。
（6）按如上方法同期進(jìn)行第2頭和第3頭種公豬的精液稀釋保存試驗(yàn)，使試驗(yàn)的相同品種公豬達(dá)3頭。
（7）分別統(tǒng)計(jì)分析7種稀釋粉稀釋3頭種公豬精液的系列檢測(cè)數(shù)據(jù)，從精子活力、保存時(shí)間等方面分析比較，選出效果較好的前3種稀釋粉，作為曲靖主推品牌進(jìn)行推廣。
3結(jié)果與分析
3.1稀釋前后精子活力的變化
稀釋前，3頭公豬原精液的精子活力為（83.96±1.15）%，用種稀釋粉配制的7種稀釋液進(jìn)行稀釋后，7種稀釋精液的精子活力都不同程度下降，其中下降幅度最小的是7號(hào)稀釋粉稀釋的精液，精子活力由原精液的83.96%降為82.75%（P＞0.05），下降1.21個(gè)百分點(diǎn)，降幅為1.44%；其次是6號(hào)稀釋粉稀釋的精液，精子活力由原精液的83.96%降為81.75%（P＞0.05），下降2.21個(gè)百分點(diǎn)，降幅為2.63%；再就依次為4號(hào)、3 號(hào)、5 號(hào)、2 號(hào)和 1 號(hào)稀釋粉稀釋的精液，精子活力依次下降3.24、3.38、3.89、5.29和6.81個(gè)百分點(diǎn)，降幅依次為3.86%、4.03%、4.63%、6.3%和8.11%，但與原精液比，差異均不顯著。詳見表 1。
由表1可知，用7種稀釋粉稀釋的精液，精子活力比稀釋前都有所下降，但差異都不顯著，說明7種稀釋粉，在規(guī)范化稀釋的情況下，稀釋后精子活力與稀釋前相比都沒有影響。但是，不同稀釋粉稀釋精液的精子活力卻有差別，3、4、5、6、7號(hào)稀釋粉稀釋精液的精子活力均在80%以上，1、2號(hào)稀釋粉稀釋精液的精子活力卻只分別為77.15%和78.67%。1、2、5號(hào)稀釋粉稀釋精液的精子活力差異不顯著，3、4、5號(hào)稀釋粉稀釋精液的精子活力差異不顯著，6、7號(hào)稀釋粉稀釋精液的精子活力差異不顯著，但1、2號(hào)稀釋粉稀釋精液的精子活力與3、4、6、7號(hào)相比有顯著差異，5號(hào)稀釋粉稀釋精液的精子活力與6、7號(hào)相比有顯著差異。初步說明用 3、4、6、7 號(hào)稀釋粉稀釋精液更有利于保障精子的活力。
3.2稀釋精液精子活力隨保存時(shí)間的變化
7種稀釋粉稀釋精液均按照每6 h檢測(cè)1次精子活力等指標(biāo)，統(tǒng)計(jì)3頭公豬的平均值，以每24 h的數(shù)據(jù)為主，詳見表2。
由表2可知，保存6 d即144 h精子活力仍在60%以上的有法國(guó)的“PRIMXCELL”、丹麥的“AC－TIYE”和西班牙的“LIFE STAR”3種稀釋粉稀釋的精液，精子活力分別為65.45%、61.04%和60.24%；保存7 d即168 h精子活力仍在60%以上的只有1種稀釋粉稀釋的精液，就是法國(guó)的“PRIMXCELL”稀釋的精液，精子活力仍有61.99%；保存8 d即192 h精子活力仍在60%以上的依然是法國(guó)的“PRIMX－CELL”稀釋的精液，精子活力仍有60.02%。從保存的活力效果看，保存8 d即192 h，精子活力最高是法國(guó)的“PRIMXCELL”稀釋的精液，精子活力60.02%；其次是丹麥的“ACTIYE”稀釋的精液，精子活力為56.46%；再就是西班牙的“LIFE STAR”稀釋的精液，精子活力為54.53%。保存12 d以上（12.75 d即306 h） 精子活力仍在30%以上的有法國(guó)的“PRIMXCELL”、丹麥的“ACTIYE”、西班牙的“LIFESTAR”和荷蘭的“Sperm Protecter ”4種稀釋粉稀釋的精液，精子活力分別為45.43%、37.07%、33.41%和32.6%。由此得出結(jié)論：在曲靖推廣使用的7種精液稀釋粉中，稀釋保存效果最好的是法國(guó)的“PRIMXCELL”稀釋粉（即4號(hào)稀釋粉），其次是丹麥的“AC－TIYE”稀釋粉（即3號(hào)稀釋粉），再就是西班牙的“LIFE STAR”稀釋粉（即7號(hào)稀釋粉），用它們稀釋的精液，保存6 d即144 h，精子活力仍在60%以上，仍符合配種要求，說明這3種稀釋粉是值得推廣使用。
4討論
（1）本試驗(yàn)用具和器皿等的清洗消毒，蒸餾水的選擇，劑量的稱量，稀釋液配制，精液稀釋、分裝和保存，品質(zhì)指標(biāo)檢測(cè)等一系列操作都非常嚴(yán)謹(jǐn)和規(guī)范，因此從曲靖推廣的7種豬精液稀釋粉中選出較好的3種稀釋粉，不僅可以作為曲靖今后的主推品牌，在曲靖以外的其他地區(qū)同樣適用。
（2）本試驗(yàn)雖然只是同期做了3頭大約克種公豬的精液稀釋保存測(cè)定試驗(yàn)，樣本數(shù)量偏少，但是在測(cè)定精子活力、密度等指標(biāo)時(shí)，每頭豬精液的每一次測(cè)定都是3個(gè)視野求出的平均值才得出結(jié)論，說明的問題還是具有代表性的。
（曲靖市畜禽改良工作站，尤如華，高春國(guó)，楊祖云，鄧德富，陳克開；云南沾益縣龍華街道畜牧獸醫(yī)站，張家貴，尹喬友）
