豬流感病毒（SIV）是正黏病毒科，A型流感病毒屬，單股負(fù)鏈RNA病毒，基因組由大小不等的8個獨立片段組成。有囊膜，囊膜上有2種纖突，分別為血凝素（HA）和神經(jīng)氨酸酶（NA），目前已知有16種HA和9種NA。目前已發(fā)現(xiàn)SIV至少有H1Nl、HlN2、HlN7、H3N2、H3N6、H4N6和H9N2等7種不同血清亞型。我國流行的豬流感亞型主要有古典型豬H1N1、類人型H3N2和類禽型H1N13種毒株。豬流感（SI）是由豬流感病毒引起的一種急性、熱性和高度接觸性呼吸道疾病，具有極高的傳染性，通常各個年齡、性別、品種的豬都易感，但很少導(dǎo)致豬的死亡。該病分布廣泛，在歐、美、亞、非等世界各大洲發(fā)病。同時，由于SIV可損害呼吸道上皮細(xì)胞，破壞宿主的免疫系統(tǒng)，容易繼發(fā)或混合感染豬繁殖與呼吸綜合征、副豬嗜血桿菌病、豬巴氏桿菌病、豬鏈球菌等呼吸系統(tǒng)疾病，導(dǎo)致幾種疾病混合感染，對養(yǎng)豬業(yè)產(chǎn)生巨大的影響。
豬流感的大規(guī)模流行，不僅對各國養(yǎng)豬業(yè)造成了嚴(yán)重影響，也對人類健康和全球經(jīng)濟安全造成了巨大威脅，這主要是因為豬是人流感病毒和豬流感病毒的“混合器”，大大增加了致病源的復(fù)雜性。2009年暴發(fā)的甲型H1N1流感病毒，包含了人流感病毒、豬流感病毒和豬流感病毒。如何在復(fù)雜的致病原中快速準(zhǔn)確的診斷和監(jiān)測豬流感，具有重要的經(jīng)濟學(xué)意義和公共衛(wèi)生學(xué)意義。因此，豬流感檢測診斷技術(shù)成為了世界各國的研究重點和申請專利的熱點，掌握豬流感檢測診斷技術(shù)在全球和中國范圍內(nèi)的專利申請情況，對其發(fā)展趨勢和研究重點進行研究和分析，合理利用現(xiàn)有專利技術(shù)，對有效控制豬流感疫情具有重要的現(xiàn)實意義和深遠(yuǎn)的戰(zhàn)略意義。
1 豬流感防控專利整體狀況分析
本文以中國專利文獻檢索系統(tǒng)（CPRS）和德溫特世界專利索引數(shù)據(jù)庫（WPI）為文獻來源。在相關(guān)領(lǐng)域主要分類號（A23L、A23K、A01K、A61K）中，以豬流感，防控，治療，預(yù)防，檢測等關(guān)鍵詞進行中英文檢索，檢索截止日為2014年4月1日。在WPI數(shù)據(jù)庫中檢索到涉及豬流感的全球?qū)＠暾埞灿?23項。
以下從專利申請整體趨勢、申請國家或地區(qū)分布、申請人類別、技術(shù)主題等角度對豬流感領(lǐng)域的世界和國內(nèi)專利狀況進行分析。
1.1 專利申請量分析
從申請數(shù)量上就可以看出，豬流感防控專利大大落后于禽流感病毒（截止到2014年4月1日，8408件）、冠狀病毒（截止到2014年4月1日，4709件）等可以導(dǎo)致人畜共患病的熱門病毒。詳見圖1。
由圖1可以看出，在2001年以前，在全球范圍內(nèi)豬流感檢測技術(shù)專利申請數(shù)量較少。2004年，全球申請量和中國申請量都出現(xiàn)大幅度的提升，尤其是在2006年之后，世界申請量和中國申請量都呈爆發(fā)式增長，這與世界范圍內(nèi)對豬流感的重視程度的提升和流感病毒在全球范圍內(nèi)的流行有密切聯(lián)系。
反觀我國豬流感檢測技術(shù)專利申請量的發(fā)展態(tài)勢，也呈現(xiàn)出逐年上升的趨勢，這種趨勢不僅與國家出臺相關(guān)政策和方案息息相關(guān)，也與我國規(guī)?；B(yǎng)殖和生產(chǎn)的不斷鋪開相關(guān)。2009年世界衛(wèi)生組織成立豬流感應(yīng)對委員會，2009年4月30日衛(wèi)生部辦公廳印發(fā)了《人感染豬流感預(yù)防控制技術(shù)指南（試行）》，同年衛(wèi)生部印發(fā)了《人感染豬流感診療方案》。相信隨著我國豬流感防控體系的逐漸完善、社會各界對豬流感防御意識的逐漸提高，未來幾年我國在該領(lǐng)域的專利申請量將繼續(xù)保持增長態(tài)勢。
1.2 專利申請量地區(qū)分布
國外禽流感專利申請量的地區(qū)分布情況詳見圖2。
從圖2中可以看出，豬流感專利申請量在全球各個國家和地區(qū)間的分布不均衡，其中中國專利申請量最多，占全球相關(guān)專利申請總量的73%，具有絕對優(yōu)勢，這種現(xiàn)狀與生豬養(yǎng)殖是我國戰(zhàn)略性政策的現(xiàn)狀有直接關(guān)系，同時，也說明我國對豬流感防控技術(shù)的研究和專利保護也比較重視。國家政策的影響力同時也體現(xiàn)在韓國和日本的相關(guān)專利申請數(shù)量上，二者分占全球申請量的9%和7%。由此可見，政府導(dǎo)向?qū)＠暾埖挠绊懢薮?，這也為我國政策制定給出了技術(shù)啟示。
國內(nèi)禽流感專利申請量的地區(qū)分布情況詳見圖3。
從圖3可以看出，我國各省份的豬流感領(lǐng)域?qū)＠暾埩糠植?，?位分別是山東、遼寧和浙江，這與山東和遼寧是國內(nèi)養(yǎng)殖大省的現(xiàn)狀緊密聯(lián)系，在上述2省中，農(nóng)牧業(yè)，尤其是生豬養(yǎng)殖是其支出型產(chǎn)業(yè)。產(chǎn)業(yè)和科技的聯(lián)系也從中有所體現(xiàn)。
1.3 主要申請人分布
豬流感防控相關(guān)中國專利申請量排在前10位的申請人是：北京大北農(nóng)科技集團股份有限公司（17件）、常州京森生物醫(yī)藥研究所有限公司（16件）、江蘇眾紅生物工程創(chuàng)藥研究院有限公司（16件）、華中農(nóng)業(yè)大學(xué)（15件）、河南農(nóng)業(yè)大學(xué)（15件）、佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院（14件）、天津市畜牧獸醫(yī)研究所（14件）、黑龍江大學(xué)（13件）、湖南出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術(shù)中心（13件）、武漢科前動物生物制品有限責(zé)任公司（13件）、中國農(nóng)業(yè)大學(xué)（13件）、中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所（13件）。
整體上看，國內(nèi)高校及科研院所的相關(guān)中國專利申請量居多（312件），這與我國研究重點還處于高校和科研院所階段相聯(lián)系，相關(guān)研究成果還處于實驗室階段，并沒有完全、高效的轉(zhuǎn)化為生產(chǎn)力。國內(nèi)企業(yè)的申請量為58件，這些企業(yè)幾乎都是生物公司，且都與高?；蛘呖蒲性核锌蒲新?lián)系。從中可以發(fā)現(xiàn)，國內(nèi)相關(guān)企業(yè)可以加強與高校和科研院所之間的橫向聯(lián)系，充分發(fā)揮產(chǎn)學(xué)研結(jié)合的作用，實現(xiàn)創(chuàng)新成果轉(zhuǎn)化，搶占豬流感檢測診斷技術(shù)的市場，推動這一領(lǐng)域的科技進步。同時，值得注意的是，國內(nèi)個人的申請量為14件，這些申請雖然發(fā)明點較低，但也說明我國民間發(fā)明創(chuàng)造的熱情，是我國科技發(fā)展中不可獲取的組成部分。
在相關(guān)中國專利申請中，國外企業(yè)來華申請占6.8%（26件），國外研究院所來華申請占0.7%（5件）。從中也可以發(fā)現(xiàn)，國外企業(yè)對中國市場的重視程度，而且隨著知識產(chǎn)權(quán)意識在全球范圍內(nèi)的不斷深化，這種重視程度會不斷加強。同時，國外企業(yè)在全球范圍內(nèi)的豬流感檢測領(lǐng)域?qū)＠季忠矔粩嗉訌?，這種趨勢需要得到我國相關(guān)部門重視。
1.4 技術(shù)領(lǐng)域分析
在豬流感防控技術(shù)領(lǐng)域，專利申請量居首的為豬流感治療用藥領(lǐng)域，其次為豬流感診斷與檢測技術(shù)領(lǐng)域。目前，國際上公認(rèn)對流感病毒有抑制作用的抗病毒化合物藥物僅有少數(shù)幾種。但作為中國傳統(tǒng)文化，利用中藥進行豬流感的預(yù)防和治療是中國專利申請中的一個特色，而且所占比例達到40%，這也說明利用本國傳統(tǒng)對現(xiàn)代疾病進行防控也是發(fā)展方向之一。作為中國傳統(tǒng)文化的重要組成部分，中醫(yī)中藥理念不但不應(yīng)該被舍棄，而應(yīng)該使其在科技的進步中發(fā)揮其更重要的作用。
至于檢測和診斷方面，豬流感作為一種傳染病，其防控主要涉及3個階段：診斷、治療及預(yù)防，其中快速檢測、早期診斷是及時治療的重要基礎(chǔ)，也可為流行病學(xué)調(diào)查提供快速、靈敏的手段。另外，有資料顯示，豬流感病原體的變異在明顯加快，這也給豬流感病毒檢測提出了更高的要求?？紤]到這些因素，筆者鎖定豬流感病毒檢測這一技術(shù)主題作深入分析，以期為豬流感檢測和診斷技術(shù)的研究和發(fā)展提供參考。
2 主要豬流感檢測技術(shù)的專利狀況與發(fā)展趨勢
2.1 豬流感主要檢測技術(shù)
豬流感病毒的基因突變率極高，尤其是其中的血凝素（HA）、神經(jīng)氨酸酶（NA）基因極易發(fā)生點突變，導(dǎo)致其編碼的蛋白氨基酸序列改變，從而逃避宿主免疫系統(tǒng)的識別和清除。豬流感病毒感染宿主后，其病理變化因感染毒株毒力的強弱、病程的長短和宿主的不同而有所不同，臨床癥狀也表現(xiàn)各異，僅通過臨床癥狀和流行病學(xué)特點很難對其進行確診。目前，豬流感的檢測方法可分為病原學(xué)檢測、免疫分析技術(shù)和分子生物學(xué)檢測3大類。在經(jīng)典的流感病毒病原學(xué)檢測方法中，雞胚分離法操作方便、敏感性強、準(zhǔn)確性高，通常被作為診斷SI的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但病毒的分離鑒定需要將病料接種雞胚或進行組織培養(yǎng)，耗時較長（幾天到1周不等），存在滯后性，無法滿足急性烈性傳染病緊急疫情防治工作的需要；血凝（HA）和血凝抑制（HI）試驗可以確定“HA”亞型。這種方法主要優(yōu)點是操作簡單、快捷，特異性好，但由于一些動物血清中含有非特異性凝血因子，可能會造成假陽性。
為了滿足快速檢測的需要，在現(xiàn)階段，免疫分析技術(shù)和分子生物學(xué)檢測技術(shù)在豬流感檢測中發(fā)揮著主導(dǎo)作用。而在專利申請內(nèi)容中，我國豬流感檢測領(lǐng)域最主要的研究熱點集中在酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）、RT-PCR技術(shù)、核酸探針技術(shù)、ELISA、基因芯片、環(huán)介導(dǎo)逆轉(zhuǎn)錄等溫擴增技術(shù)6大方法上。
2.2 全球相關(guān)專利申請涉及的主要檢測技術(shù)
在檢測技術(shù)方面，國外的優(yōu)勢還是相對明顯。采用感染性分子克隆技術(shù)得到的產(chǎn)物進行豬流感病毒檢測的相關(guān)專利較多，采用多重或熒光定量PCR技術(shù)檢測豬流感病毒的專利也占有一席之地，同時，還有采用微陣列技術(shù)、膠體金試紙條進行病毒檢測的報道。相對而言，以美國、法國研究機構(gòu)和企業(yè)為首的許多國外研究機構(gòu)和體外診斷試劑開發(fā)企業(yè)，從檢測的靈敏度、精確性等方面對使用ELISA技術(shù)檢測診斷豬流感進行了深入研究。日本、新加坡等亞洲國家在豬流感檢測技術(shù)及試劑盒的開發(fā)方面也表現(xiàn)不俗?，F(xiàn)在國外的豬流感檢測技術(shù)主要發(fā)展趨向為高通量、迅速、特異。國外豬流感疫苗相關(guān)專利多為基因工程類疫苗，例如具有標(biāo)記功能的重組豬流感疫苗、采用反向遺傳操作的豬流感病毒感染性分子克隆的構(gòu)建，還有轉(zhuǎn)基因植物疫苗也有專利報道。國外在豬流感治療方面也側(cè)重于利用分子生物技術(shù)進行相應(yīng)的輔助治療，包括植物提取物的免疫增強療法和重組豬流感病毒療法等。
2.3 主要豬流感檢測技術(shù)的應(yīng)用特點和典型專利申請介紹
豬流感檢測技術(shù)由最初的病毒分離與鑒定、經(jīng)典血清學(xué)診斷方法，發(fā)展到更快速簡便的免疫學(xué)和分子生物學(xué)方法，近幾年又出現(xiàn)了融合多學(xué)科精髓的高通量芯片技術(shù)，使得豬流感檢測技術(shù)逐步向著高靈敏度、高通量、更迅速、更特異、更簡便的方向邁進。
（1）單克隆抗體檢測：
隨著單克隆抗體篩選技術(shù)的不斷進步，利用該技術(shù)為核心檢測豬流感成為科研發(fā)展重點，包括以單克隆抗體建立的間接免疫熒光試驗、膠體金法、ELISA法等。該技術(shù)的關(guān)鍵點在于抗體結(jié)合的特異性和敏感性，而由于樣品中HA蛋白的抗原決定簇被包在蛋白結(jié)構(gòu)內(nèi)部無法接觸到抗體，因此在使用單克隆抗體檢測時往往需要將樣品進行預(yù)處理，常見的是加熱處理，使包埋的抗原決定簇暴露出來。但是同時也會帶來檢測程序的復(fù)雜化，延長檢測時間的缺點。同時加熱會導(dǎo)致樣品中的其他各種蛋白變性，對檢測結(jié)果產(chǎn)生噪音，導(dǎo)致檢測的特異性降低。而在實際檢測過程中，H1與H3亞型豬流感，特別是H1N1、H3N2和H1N2亞型豬流感是流行性流感病毒，在世界各地都有所分離。同時由于豬的“混合器”作用，可以同時感染禽源、人源流感病毒，而產(chǎn)生具有新抗原性、遺傳特性、致病特性的基因重排病毒，進而使病毒可能突破種間屏障、擴大感染譜系，危害動物及人類健康。雖然人H1N1流感病毒被認(rèn)為不能在豬體內(nèi)繁殖長期存在、顯現(xiàn)一過性感染，但近年從臨床上也分離到了類人H1N1（Human-likeH1N1）亞型SIV。因此，如何在如此繁雜的混合病毒中更準(zhǔn)確的檢測相應(yīng)的病毒成為現(xiàn)階段此技術(shù)的發(fā)展重心。專利申請CN101974078A提供了一種特異性結(jié)合H1亞型豬流感病毒抗體，與其他病癥相似的病毒抗體均為陰性反應(yīng)，在檢測時無需對待測樣品進行過多處理即可方便地獲得精確的檢測結(jié)果，可以大幅度提升檢測的便捷性和正確性。
（2）酶聯(lián)免疫吸附試驗：
ELISA敏感性高、特異性強、操作簡便，適用于大規(guī)模檢測。目前我國研發(fā)的豬流感ELISA診斷方法包括豬流感病毒檢測ELISA和豬流感抗體檢測ELISA兩種。目前，國內(nèi)的主要申請重心為商業(yè)化的ELISA檢測試劑盒，其申請人主要是與高?；蚩蒲性核献鞯膰鴥?nèi)企業(yè)。雖然ELISA法用于流感病毒的檢測方法發(fā)展迅速，已經(jīng)成為一種比較成熟的診斷方法，但是作為免疫檢測技術(shù)，還存在一定局限性，如血清中可能存在感染試驗的因素干擾試驗的結(jié)果。針對這一難題，湖南出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術(shù)中心的專利申請CN102002480A，CN101988050A分別公開了抗H3N2，H1N1豬流感病毒血凝素蛋白單克隆抗體，雜交瘤細(xì)胞株及抗原捕獲ELISA試劑盒，所述ELISA試劑盒可特異地檢測含有H3N2，H1N1豬流感病毒的待測動物抗血清，可檢蛋白樣本的OD值在0.056～0.093之間，能檢測出2-1個HA單位的抗原，準(zhǔn)確率可以達到100%。
（3）核酸探針雜交技術(shù)：
核酸探針雜交技術(shù)是目前生物化學(xué)和分子生物學(xué)研究應(yīng)用最廣泛的技術(shù)之一，是定性和定量檢測特異性DNA或RNA的有力工具，為從分子水平探討豬流感的發(fā)病機理和臨床早期快速診斷提供了新的研究手段。為滿足對流感疫情的早期控制預(yù)警的要求，該技術(shù)多結(jié)合基因芯片技術(shù)應(yīng)用于豬流感病毒檢測，實現(xiàn)高通量、大批次的檢測效果。例如，專利申請CN102943129A提供了10條用于同時檢測豬流感病毒、豬繁殖與呼吸道綜合征病毒、偽狂犬病病毒、豬傳染性胃腸炎病毒和口蹄疫病毒的引物和多重連接探針，可同時對上述5種病毒進行檢測、分型或鑒定，并能鑒別病毒的高致病性，大大縮短了流感病毒的檢測時間，且提高了檢測準(zhǔn)確率。
（4）PCR技術(shù)：
PCR是鑒定流感病毒基因組的一種很有效的方法，已成功用于動物流感病毒的鑒別診斷。在豬流感病毒的檢測方面，主要是根據(jù)流感病毒NP基因、M基因保守序列，設(shè)計合成引物實現(xiàn)目的序列的擴增。在此基礎(chǔ)上，實時熒光定量PCR是將熒光基團加入PCR反應(yīng)體系中，利用熒光信號積累對整個PCR進程實時監(jiān)測，該方法更多地被應(yīng)用于病毒分型檢測。例如A型和B型流感病毒的檢測，通過檢測流感病毒的M基因、HA基因來區(qū)別A和B型流感病毒，或用于區(qū)別A型流感病毒的亞型。隨著2009年5月中國研究人員對甲型H1N1流感病毒部分基因組序列測定及分析工作完成，各科研院所和企業(yè)聯(lián)合推出了一系列的診斷試劑和試劑盒。北京大北農(nóng)科技集團股份有限公司在CN103014176A公開了一組用于豬流感病毒SYBGREENIReal-timePCR檢測法的引物集，包括豬流感病毒通用型M基因、H1亞型、N1亞型、H3亞型和N2亞型引物，該引物適用于SYBRGreenI染料法，以降低SIV的檢測成本，并實現(xiàn)對SIV的快速分型檢測，為臨床監(jiān)測SIV疫情動態(tài)和流行趨勢提供技術(shù)支撐。
（5）環(huán)介導(dǎo)逆轉(zhuǎn)錄等溫擴增技術(shù)：
環(huán)介導(dǎo)等溫擴增技術(shù)（loop-mediatedisothermalamplification，LAMP）是2000年Notomi等建立的一種新的體外核酸擴增技術(shù)，該技術(shù)可以不需任何PCR儀和檢測儀，通過具有鏈置換活性的DNA聚合酶的合成作用，在60℃左右的恒溫條件下特異、高效、快速地擴增靶序列，不到1h就能擴增109倍，擴增產(chǎn)物可以直接觀察。LAMP技術(shù)不但可以檢測DNA，在反應(yīng)體系中加入反轉(zhuǎn)錄酶后也可檢測RNA，并且反轉(zhuǎn)錄和等溫擴增可以在同一反應(yīng)管中進行。建立能靈敏、特異性強地診斷豬流感病毒亞型的RT-LAMP方法的前提是針對病毒亞型基因亞型保守區(qū)設(shè)計特異性引物。中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所的劉業(yè)兵等人在CN101629217A中針對上述需求，根據(jù)GenBank公布的SIV不同亞型的基因序列，針對PA序列相對保守區(qū)域設(shè)計了SIVRT-LAMP簡并引物6條，以豬流感H1、H3、H5、H9亞型毒株為模板，建立了可以檢測所有亞型豬流感毒的RT－LAMP方法。通過敏感性試驗證明：本方法可對100TCID50SIV樣品RNA進行10－4稀釋后仍可高效擴增，顯示出本方法高度的敏感性；通過特異性實驗和19份臨床樣品的SIV病原的RT-LAMP檢測，有5份樣品檢測到病料中SIV核酸為陽性，與RT-PCR、雞胚分離結(jié)果一致，經(jīng)基因芯片分型鑒定驗證，綜合結(jié)果符合率為100%。顯示本方法特異、敏感、快速，適合用于各種試驗條件下SIV的檢測。
（6）基因芯片和蛋白質(zhì)芯片檢測技術(shù)：
基因芯片就是將大量已知DNA序列的探針通過一定方式固定于某種固相載體表面，形成致密、有序的DNA分子點陣。利用抗原抗體結(jié)合特性制備的蛋白質(zhì)芯片技術(shù)不僅保留了抗原抗體反應(yīng)快速、靈敏和特異性的特點，還可以滿足生物樣本多指標(biāo)分析的需要，因此比較有利于大規(guī)模推廣和產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用。但該技術(shù)的主要障礙就是篩選到敏感性好和特異性高的標(biāo)志物，在混合樣品中檢測出目的致病源。山東澳蘭生物工程研究院的專利申請CN1616682A中提供了一種用于診斷豬病毒病的基因芯片，其中包括：固定在固相載體上的與待檢致病病原種類相對應(yīng)的待測致病病原特征性DNA和/或cDNA片段，其中采用的特征性片段由豬瘟病毒、口蹄疫病毒、偽狂犬病病毒、豬傳染性胃腸炎病毒、豬繁殖和呼吸綜合征病毒、豬流感病毒、豬細(xì)小病毒、豬呼吸道冠狀病毒、豬輪狀病毒、豬流行性乙型腦炎病毒病原基因特征性片段組成，可快速高效的對上述10種病毒進行檢測，與現(xiàn)有技術(shù)中的病毒分離法、ELISA法相比較，符合率為96%。
2.4 豬流感主要檢測技術(shù)的功效對比
傳統(tǒng)的診斷方法中由于豬流感病毒自身的變異特點，導(dǎo)致操作繁瑣、費時，重復(fù)性差，限制了實際臨床中的快速診斷，但傳統(tǒng)的診斷方法由于效果直觀在豬流感病毒的初次分離和亞型鑒定中起著非常重要的作用。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，基于分子生物學(xué)原理建立的方法，為快速準(zhǔn)確的診斷和監(jiān)測豬流感提供了有效的方法。因此在今后的發(fā)展方向上，應(yīng)把傳統(tǒng)的豬流感診斷方法和現(xiàn)代的分子生物學(xué)診斷新技術(shù)有效的結(jié)合起來，為有效診治和防制豬流感提供科學(xué)依據(jù)。迄今為止，我國尚沒有統(tǒng)一的衡量豬流感病毒診斷試劑質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)。而該標(biāo)準(zhǔn)的建立則需要考慮靈敏度、特異性、檢測效率、易用性等多方面?；诂F(xiàn)有技術(shù)及相關(guān)重點專利文獻技術(shù)信息給出的功效方面的優(yōu)劣勢對比結(jié)果，我們可以看到，單一的方法中LAMP法、RT-PCR法、ELISA法預(yù)計將成為下一階段豬流感病毒檢測技術(shù)的研發(fā)和應(yīng)用重點，但如果想成為一種豬流感檢測的“金標(biāo)準(zhǔn)”，尚需要對上述幾種檢測技術(shù)進行進一步的完善或者進行幾種方法的融合，進行協(xié)同檢測。
此外，現(xiàn)有技術(shù)中尚有多種新興的檢測手段，例如，焦磷酸測序技術(shù)（pyrosequencing）。該技術(shù)是由Nyren等人于1987年發(fā)展起來的一種新型的酶聯(lián)級聯(lián)測序技術(shù)，焦磷酸測序法適于對已知的短序列的測序分析，其可重復(fù)性和精確性能與Sanger測序法相媲美，而速度卻大大的提高。焦磷酸測序技術(shù)產(chǎn)品具備同時對大量樣品進行測序分析的能力，為大通量、低成本、適時、快速、直觀地進行單核苷酸多態(tài)性研究和臨床檢驗提供了非常理想的技術(shù)操作平臺。該技術(shù)進行改進后可以滿足上百個核著酸序列的測序工作，又可以滿足對重要微生物的鑒定與分型、特定DIVA片段的突變檢測和克隆鑒定等方面的應(yīng)用。目前，我國己經(jīng)有由山東出入境檢驗檢疫局主持研究的《豬A型H1N1流感病毒焦磷酸測序方法》已通過國家標(biāo)準(zhǔn)化委員會的審定，批準(zhǔn)作為國家標(biāo)準(zhǔn)予以推廣應(yīng)用，焦磷酸測序檢測方法也是世界衛(wèi)生組織（WHO）推薦的流感病毒快速確證方法，建議在全球范圍內(nèi)推廣應(yīng)用。但尚沒有利用該技術(shù)進行SIV檢測的技術(shù)方案申請專利的先例。
3 對行業(yè)發(fā)展及專利申請的建議
豬流感作為豬的一種重要傳染病，嚴(yán)重危害養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展。尤其是近年來人流感、豬流感、禽流感呈現(xiàn)出混合感染、混合發(fā)病的趨勢。其中豬作為流感病毒儲存宿主和混合器的作用，已經(jīng)引起了人們對公共衛(wèi)生安全的高度重視。如何更好的合理利用知識產(chǎn)權(quán)，提升產(chǎn)業(yè)和行業(yè)的整體水平，需要政府與企業(yè)共同努力。生豬養(yǎng)殖作為我國戰(zhàn)略性的穩(wěn)定保證，需要更高效、完善的技術(shù)防護和支持，其中專利發(fā)揮的作用必定越來越重要。
針對以上情況，我國應(yīng)當(dāng)將養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)發(fā)展與相關(guān)區(qū)域規(guī)劃統(tǒng)籌考慮，尤其是在山東、浙江等農(nóng)業(yè)生產(chǎn)大省，為生豬養(yǎng)殖及產(chǎn)品加工領(lǐng)域在立項、資金、稅收各方面提供針對性的產(chǎn)業(yè)政策支持，需要建立以政務(wù)政策為導(dǎo)向的領(lǐng)域發(fā)展戰(zhàn)略，進一步提升和穩(wěn)定生豬養(yǎng)殖的戰(zhàn)略地位，用技術(shù)為生產(chǎn)保駕護航。其次，應(yīng)積極進行產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變，從小規(guī)模、散戶經(jīng)營轉(zhuǎn)化為大規(guī)模養(yǎng)殖場和生態(tài)養(yǎng)殖，從勞動密集型向資本密集型、環(huán)境友好型轉(zhuǎn)變，這樣既有利于產(chǎn)品品質(zhì)的提升和穩(wěn)定，又易于通過產(chǎn)量優(yōu)勢形成地區(qū)或企業(yè)優(yōu)勢，打造知名品牌，提升競爭力；再次，還應(yīng)加大對豬流感防控相關(guān)產(chǎn)品的研究力度，延伸產(chǎn)業(yè)鏈長度，提升產(chǎn)品附加值；另外，應(yīng)大力推進產(chǎn)學(xué)研一體化，企業(yè)領(lǐng)導(dǎo)人應(yīng)該主動聯(lián)系科研院所，多學(xué)習(xí)、多交流，使產(chǎn)業(yè)資本與高校和科研院所人才和技術(shù)的優(yōu)勢有效對接，加快產(chǎn)業(yè)發(fā)展速度。
（國家知識產(chǎn)權(quán)局專利局，呂健，黃蕊；中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所，高飛，袁世山，童光志）
